Estabilidade do antígeno de célula total de Brucella abortus para uso no diagnóstico sorológico da brucelose bovina pela reação de fixação de complemento / Stability of Brucella abortus whole cell antigen for use in the serological diagnosis of bovine brucellosis by the complement fixation test

A reação de fixação de complemento é um dos testes usados no diagnóstico confirmatório da brucelose bovina, e para sua realização emprega-se o mesmo antígeno usado na prova de soroaglutinação lenta, porém não foi possível encontrar na literatura estudos sobre a estabilidade desse antígeno para uso na prova de fixação de complemento, de modo a estabelecer um prazo de validade para o mesmo. Por isso, esta investigação teve por objetivo avaliar a estabilidade do antígeno de célula total de Brucella conservado sob refrigeração, para uso na reação de fixação de complemento. Analisaram-se 14 partidas de antígeno, preparado com Brucella abortus amostra 1119/3 e padronizado para uso na prova de soroaglutinação lenta, com tempo de fabricação variando de 9 meses a 23 anos e 11 meses. Testaram-se 167 soros bovinos com títulos variáveis de anticorpos contra Brucella, adotando-se a técnica com incubação a 37ºC nas duas fases da reação e 5 unidades hemolíticas 50 por cento de complemento. Considerou-se como positivo o soro com pelo menos 25 por cento de fixação de complemento na diluição 1:4. Compararam-se os resultados obtidos com as 13 partidas de antígeno com aqueles obtidos com a partida com 9 meses de fabricação, usando o teste de chi2 de McNemar e o coeficiente kappa. A grande maioria dos soros apresentou resultados muito próximos quando testados com as diversas partidas de antígeno, e não se observou relação entre tempo de fabricação do antígeno e diferenças nos resultados obtidos.

The complement fixation test is used worldwide in the confirmatory diagnosis of bovine brucellosis. For this technique the antigen is the same as the one used in the tube agglutination test. However, literature is poor in information about the stability of the whole cell Brucella antigen for use in the complement fixation test to establish a time of validity of the antigen. Hence the aim of this investigation was to evaluate the stability of this antigen under refrigeration for use in the complement fixation test. Fourteen batches of antigen prepared with Brucella abortus strain 1119/3, produced from 9 months to 23 years and 11 months before, were analysed. One hundred and sixty-seven cattle sera with varying titres of antibodies to Brucella were tested through the warm complement fixation microtechnique with five 50 percent haemolytic units of complement. Sera with at least 25 percent of complement fixation in dilution 1:4 were considered positive. The results with 13 of the antigen batches were compared with the results obtained with the batch produced 9 months before by the McNemar chi2 test and kappa statistic. The oldest antigen batch gave a higher proportion of sera titres which were exactly the same observed with the 9-month-batch (90.4 percent), and the antigen produced 4 years and 3 months before the test gave de lowest proportion of sera with the same titre of the 9-month-antigen (73.7 percent). The comparison of the results after being classified as positive and negative showed that the highest proportion of agreed results was observed with the antigen produced 21 years and 4 months before (98.8 percent, kappa 0.98). The antigen with the lowest proportion of agreed results was the one produced 3 years and 2 months before (91.6 percent, kappa 0.84). The results of the study show that most sera gave very similar results with all antigen batches evaluated, and that there was no relationship between the period of antigen production...

A conglutination test for rapid detection of antibodies against Babesia bigemina

A rapid conglutination test (RCT) with performance comparable to the indirect fluorescent antibody technique (IFAT) was developed to detect antibodies against Babesia bigemina (B. bigemina-RCT). The B. bigemina-RCT is a sensitive, specific, economical, and rapidly performed serological test suitable for field application or minimally equipped laboratories. This test had a sensitivity of 90.9 percent, and specificity of 97.6 percent, compared to IFAT, which showed for the same parameters respectively, 98.3 percent and 99.7 percent. The early detection of anti- B. bigemina immunoglobulins by RCT in experimental infections was nearly parallel to that of IFAT. Cross reactions were observed with sera from calves experimentally infected with Babesia bovis (1.8 percent) and with Anaplasma marginale (1.2 percent). RCT antigen prepared with non parasitized erythrocytes (negative antigen) showed 1.5 percent, 3.5 percent and 2.2 percent of positive reactions with sera from animals experimentally infected with B. bigemina, B. bovis and A. marginale. However, none of the sera from animals of endemic areas for babesia infection resulted in positive reactions with the negative antigen. Considering these results and shelf life over six months, the B. bigemina-RCT could be used for epidemiological surveys and evaluation of control measures against this species of Babesia.

Um teste rápido de conglutinação (TCR) com desempenho comparável a imunofluorencência indireta (IFI) foi desenvolvido para detectar anticorpos contra Babesia bigemina. O TCR-B.bigemina é um teste sorológico sensível, econômico e executável rapidamente; apropriado para condições de campo ou laboratórios com estrutura mínima. Este teste tem uma sensibilidade de 90,9% e especificidade de 97,6%, enquanto que a IFI apresentou para os mesmos parâmetros, respectivamente, 98,3% e 99,7%. Nas infecções experimentais a detecção de imunoglobulinas anti-B. bigemina pelo TCR foi aproximadamente a mesma da IFI. As reações cruzadas verificadas nos soros de bezerros experimentalmente infectados com Babesia bovis e Anaplasma marginale foram 1,8% e 1,2%, respectivamente. O antígeno preparado com eritrócitos não parasitados (antígeno negativo) apresentou 1,5%, 3,5% e 2,2% de reações positivas com os soros de animais infectados com B. bigemina, B. bovis e A. marginale. Entretanto, nenhum dos soros dos animais de áreas endêmicas para infecção de babésia resultaram em reações positivas com o antígeno negativo. Considerando estes resultados e o período de viabilidade do antígeno de TCR, acima de seis meses, possibilita o TCR-B. bigemina ser utilizado em levantamentos epidemiológicos e na avaliação das medidas de controle contra esta espécie de Babesia.

Antigenic relatedness of selected flaviviruses: study with homologous and heterologous immune mouse ascitic fluids

A relacao antigenica de 9 Flavivirus, febre amarela (YF), Wesselsbron (WSL), Uganda S (UGS), Potiskum (POT), West Nile (WN), Banzi (BAN), Zika (ZK), Dengue tipo 1 (DEN-1) e Dengue tipo 2 (DEN-2), foi avaliada por reacao de inibicao da hemaglutinacao cruzada (cross-HI) e reacao de fixacao do complemento cruzada (Cross-CF) entre cada um dos virus e seu fluido ascitico homologo em camundongos. Medias de titulos foram calculadas usando os titulos heterologos e homologos. Reacoes cruzadas CF revelaram maiores variacoes antigenicas entre virus do que reacoes cruzadas HI. Nao houve variacao antigenica significativa entre virus WSL, POT e YF usando cada um dos metodos. Todavia, diferencas definidas da antigenicidade foram observadas entre eles e os virus UGS, BAN e ZK. Nao existiram diferencas significativas entre UGS, BANe ZK ou entre DEN-1 e DEN-2. A relacao sorologica entre Flavivirus e importante para se estabelecer o diagnostico e a epidemiologia destas infeccoes na Africa

Heart aneurysm in Chagas' disease

Trata-se de estudo prospectivo referente a lesao apical da cardiopatia chagasica em 41 coracoes humanos. A relatada falta de correlacao entre frequencia da lesao e peso do coracao, descartou o fator patogenico vascular. Neste trabalho avalia-se a insuficiencia coronaria relativa incluindo outras variaveis alem do peso do coracao. A perfusao do leito capilar com gel de cores diferentes para cada coronaria (verde e amarelo) permitiu delimitar seus territorios antes de separar os atrios e a gordura sub-epicardica. As paredes livres dos ventriculos direito (RV) e esquerdo (LV) definiram o indice RV/LV. O peso do miocardio ventricular corado em verde (arteria coronaria direita-RC) e o peso ventricular total (VW) definiram o indice RC/VW. O peso do coracao e esses dois indices, graduados e somados, compuseram um "score" de valor inversamente proporcional a condicao de irrigacao do miocardio...

Inmunodiagnóstico en 647 casos clínicos sospechosos de toxoplasmosis / Immunodiagnosis in 647 clinical cases of toxoplasmosis suspected

Though Toxoplasma gondii can cause severe pathology in human, in most of the cases it asymptomatic infection. So, it is important to dispose some methods capables to discriminate and chronic infections. An indirect hemagglutination test (IHAT), dye test (DT) and complement fixation test (CFT) were performed in 647 sera from patients suspected of having toxoplasmosis infection. IHAT and DT titer > the same as 4 and CFT > the same as 5 were considered positive. Titers were classified as follows: low (4-16), median (64-512) and high (> the same as 1000) for IHAT and DT. The pathologies for demanding these serological tests were: adenopathies (58), nephropathies (72), neuropathies (30), obstetrical problems (65), opthalmopathies (147), AIDS (237) and miscellaneous (37). Global positvity of 49.5 percent and 4.5 percent for IHAT/DT and CFT respectively were found. The positvity for the different groups were: adenopathies (48.3 percent and 13.8 percent), nephropathies (43.1 percent and 1.4 percent), neuropathies ,(26.7 percent and 3.3 percent), obstetrical problems (40.0 percent and 0.0 percent), ophthalmopathies (59.9 percent and 8.2 percent), AIDS (52. 1 percent and 2.5 percent) and miscellancous (40.5 percent and 2.7 percent) for IHAT/DT and CFT respectively. Low and median titers for IHAT/DT were found in 81.3 percent of cases. A high agreement in frequency of concordant and discordant titers of IHAT/DT and CFT, indicating a recent or acute infection was observed. This fact was more relevant in adenopathies, ophthalmopathies (uveitis) and AIDS groups

Avaliação de uma nova microtécnica de fixação de complemento (Garcia & Sotelo, 1991) para o diagnóstico da doença de Chagas crônica com diferentes preparaçoes antigênicas / The evaluation of a new complement fixation microtechnic (Garcia & Sotelo, 1991) for the diagnosis of chronic Chagas disease with different antigenic preparations

No presente trabalho, avalia-se a nova fixação de complemento, comparativamente à imunofluorescência indireta, para o diagnóstico da doença de Chagas crônica, utilizando um extrato aquoso de formas epimastigotas do Trypanosoma cruzi e três extratos etanólicos: um de epimastigotas, um de tripomastigotas e outro de amastigotas obtidas de cultura. Empregaram-se 236 amostras testadas por imunofluorescência indireta: 109 positivas (20 com diagnóstico parasitológico) e 127 amostras negativas (96 de doadores de sangue e 31 de portadores de outras patologias). Os resultados mostraram que é possível obter reação positiva em amostras diluídas até 1:16. Os melhores limiares de reatividade encontrados foram a diluição 1:4 para o extrato etanólico de amastigotas e 1:2 para os demais antígenos. Os índices de correlação entre a nova fixação de complemento e imunofluorescência indireta indicaram o extrato etanólico de epimastigotas como o antígeno mais adequado para fins de diagnóstico entre as preparações testadas, tendo apresentado índice de co-positividade com a imunofluorescência indireta de 0,92207 e índice de co-negatividade de 0,90000. Conclui-se que a nova fixação de complemento mostrou-se ser uma microtécnica semi-quantitativa rápida, sensível, barata e de fácil execução, aplicável ao diagnóstico da doença de Chagas crônica.

From this present data it has been evaluated a new complement fixation test, comparatively to indirect immunofluorescence to diagnose chronic Chagas' disease, utilizing one watery extract of epimastigotes of Trypanosoma cruzi and three other ethanolic extracts: one from epimastigotes, one from tripomastigotes and a third one of amastigotes obtained from cultures. Utilizing 236 serum samples indirect immunofluorescence test was performed: 109 positives (20 of them with positive parasitologic diagnostic) and 127 negatives (96 of healthy blood donors and 31 with other diseases). The results have showed that is possible a positive reaction in diluted samples up to 1:16. The best limits of reactivity found were the dilutions 1:4 for the ethanolic extract of amastigotes and 1:2 for the others antigens. The correlation index among the new complement fixation test and indirect immunofluorescence test showed that the ethanolic extract from epimastigotes was the best antigen to be utilized to diagnosis purposes. Its co-positivity index with indirect immunofluorescence was 0.92207 and the co-negative index was 0.90000. Concluding, the new complement fixation test showed itself as a fast, sensible, easily applicable semiquantitative microtechnique to the diagnosis of chronic Chagas' disease.

antigenic variation of foot and mouth disease virus of the last three isolates in Egypt

Three FMD viral isolates had been isolated from different outbreaks at three governorates [Sharquia, Suez, and Agga locality] during 1972, 1987, and 1993 from cattle respectively. The isolates were tested by coinplement fixation test [CFT] angainst the seven serotypes and the results revealed that all strains were of the type [O] FMD virus. The studied isolates were adapted after the 3[rd] and 4[th] passages to BEK cell cultures, they yielded infective titers ranging between 4 and 5.5 log 10 TCID[50] and complement fixing titers between 1.37-1.75 log[10] CFU/ml. Antigenic relationship and dominating state studies for the three isolates using the crosswise C.F.T. revealed that isolates [O[1]/72 and O[1] /87] and [O[1]/72] and O[1]/93] showing a little antigenic variation and can be classified as [Subtype similar but still different] and have a percentage between [32% to 70%] while isolates [O[1]/87 and O[1] /93] classified as [Subtype Similar] and have percentage between [70%-100%]. The dominance determination for isolated strains showed that isolate strain [O[1]/87] is dominating strain [O[1]/72 and O[1] /93] and strain O[1]/72 is dominating strain O[1]/93. The nucleotide sequence data of VPI of the isolated strains [O[1]/72, O[1]/87 and O[1]/93] revealed that the homology% FMD virus [O[1]/72, O[1] 87 with O[1]/93] were 86% and 88% respectively, while the homology% between O/87 and O/93 was 94%. This indicates a closer relationship between O[1]/87 and O[1]/93 isolates thorn to O[1]/72. The variation of the results between CF test and nucleotide sequence homology may be attnbuted to the fact that CF test is carried on the whole FMDV while the nucleotide sequence homology carried out on the level of VPI gene. However, this difference is not of a significant value that necessitates the change of the already applicable vaccinal strain

Diagnóstico de la neurocisticercosis humana mediante ELISA-IgG usando un antígeno purificado / Diagnosis of human neurocysticercosis by ELISA-IgG using a purified antigen

An analysis of inmunodiagnosis data for human neurocysticercosis (NC) by ELISA-IgG, complement fixation (CSF) from confirmed cases of different hospitals from the metrolitan area of Santiago, Chile, was performed. The cut-off value was determined by using serum samples from 60 apparently healthy persons, whose absorbance values were the mean plus three standard desviations. The sensitivity of ELISA was 97,0 percent and 100 percent for serum samples and CSF respectively. This assay was considered od statistical significance (p< 0,05) when it was compared with CFT. Specificity was stablished by testing a purified antigen over 109 different helminthiasis serum samples, 185 neurological affections other than NC and 60 control samples. A 98,3 percent of global specificity was found. The use of ELISA-IgG and a purified antigen in the approach of inmune diagnosis of NC is considered a useful assay, particularly if it is perfomed on paired serum/CSF samples.

Field evaluation of a diagnostic protocol for Chagas' disease and rangeliosis

The present paper evaluates the protocol for the diagnosis of Chagas' diseases and rangeliosis that is suitable for use in remote and scarcely populated rural areas. Beginning with a blood sample taken by venipuncture in the rural dispensary from 350 inhabitants of Caser­o La Sierra, Cojedes State, Venezuela, samples were analyzed at a laboratory located at a distance of 150 Km. Each blood sample was analyzed for blood and clot culture, artificial xenodiagnosis, inoculation into mice, complement fixation reaction (CFR), and indirect fluorescent antibodies test (IFA). Nine isolates of trypanosomes were obtained and identified as Trypanosoma rangeli, 29.4 percent of the blood samples showed seropositivity for Trypanosoma cruzi, 7.1 percent of total of persons between 6 and 18 years were found infected with T. rangeli, suggesting active transmission of this trypanosome in an endemic area for Chagas' disease. Results indicate that this protocol of study is reliable, economical and sufficiently versatile to study both rangeliosis and Chagas' disease

Análise de testes de conglutinaçäo rápida para detecçäo de anticorpos contra Babesia bovis e Babesia bigemina / Evaluation of rapid conglutination tests for detection of antibodies against Babesia bovis and Babesia bigemina

Testes de conglutinaçäo rápida foram desenvolvidos para detecçäo de anticorpos contra Babesia bovis e B. bigemina. O primeiro (TCR-B. bovis) apresentou resultados idênticos à imunofluorescência indireta (IFI), na detecçäo de anticorpos resultantes da vacinaçäo com cepas atenuadas de B. bovis, enquanto que o segundo teste de conglutinaçäo (TCR-B. bigemina) divergiu em três dos seis animais na fase inicial da soroconversäo. Aos 28 e 56 dias pós-vacinaçäo (PV) houve coincidência total de resultados. A correlaçäo entre os TCR-B. bovis e IFI no exame dos soros de bovinos de sete estados brasileiros foi de 86,2 por cento, enquanto que a correlaçäo entre TCR-B. bigemina e a prova de imunofluorescência foi de 95,6 por cento. Os resultados demonstraram que os testes de conglutinaçäo podem ser empregados em estudos epidemiológicos com eficiência comparável à imunofluorescência indireta

Estudo comparativo e valor referencia de positividade de testes imunologicos para o diagnostico da neurocisticercose humana / Comparative study and reference value of positivity of imunological tests for human neurocisticercose diagnostic

Foram estudadas quatro tecnicas imunologicas para o diagnostico da neurocisticercose. A reacao imunoenzimatica e de grande valor para o diagnostico da neurocisticercose, principalmente quando os cisticercos encontram-se calcificados, as reacoes de fixacao de complemento e imunofluorescencia, embora menos sensiveis que a imunoenzimatica, sao melhores indicativos de cisticercose em atividade. O teste ELISA-conta, que utiliza contas como suporte solido substitui o teste ELISA em placas, sem prejuizo para o dignostico, tendo a grande vantagem da reducao de custo

Neurocisticercose com quadro clinico inicial de meningite aguda / Neurocisticercosis with clinical forms of acute meningitis

Sao apresentados 27 casos de neurocisticercose, com quadro clinico inicial de meningite aguda, atendidos no Hospital Universitario Regional do Norte do Parana (HURNP - Universidade Estadual de Londrina). Vinte (74,1 por cento) pacientes eram do sexo masculino; a idade variou de 4 a 52 anos (23,6 + ou - 11,7 anos); 11 tinham menos de 20 anos, 10 tinham entre 21 e 30 anos e 6, mais de 30 anos...

A reaçäo imunoenzimática para neurocisticercose no líquido cefalorraquidiano: correlaçäo com a reaçäo de Weinberg e imunofluorescência indireta / The immunoenzimatic assay to neurocysticercosis in the cerebrospinal fluid: correlation with Weinberg's reaction and indirect immunofluorescence

Com o objetivo de correlacionar as metodologias empregadas no imunodiagnóstico de neurocisticercose (NNC), os autores realizaram as reaçöes de Fixaçäo de Complemento (FC), imunofluorescência indireta (IFI), e enzimaimunoensaio (ELISA) em 1547 amostras de líquido cefalorraquidiano (LCR provenientes de pacientes com suspeita de NCC atendidos no Hospital Universitário Regional do Norte do Paraná (HURNP), no período de fevereiro de 1991 a fevereiro de 1993. As reaçöes imunológicas no LCR foram realizadas no Setor de Imunologia Clínica do HURNP, empregando para a reaçäo de FC a técnica quantitativa de Kolmer com extrato alcóolico de Cysticercus cellulosae como antígeno (Lio Serum); IFI com lâminas contendo fragmentos de parasitas fixados (Lio Serum), conjugado fluorescente anti-IgG humano (Biolab Merieux) e a reaçäo de ELISA, empregando extrato salino do antígeno de Cysticercus cellulosae, segundo padronizaçäo descrita na literatura, e demais reagentes (conjugado enzimático peroxidase, substrato OPD, H2SO4 1 N) da Abbott Laboratories. Como grupo controle utilizou-se de 50 amostras de LCR normais, provenientes de pacientes atendidos em outros serviços do HURNP. Os resultados permitiram classificar as amostras em 2 grupos I - 1281 (82,81 porcento) näo apresentaram nenhuma reaçäo reagente para NCC e II - 263 (17,0 porcento) apresentaram, pelo menos, uma reaçäo imunológica reagente para NCC...

Comparaçäo de diferentes testes sorológicos no diagnóstico da amebíase no Brasil / Amoebiasis diagnostic and its comparision with different sera tests

Foram testados, frente às reaçöes de hemaglutinaçäo indireta (HAI), reaçäo de imunofluorescência indireta (RIFI), fixaçäo de complemento (RFC) e contraimunoeletroforese (CIE), soros de 154 pacientes com diagnóstico parasitológico positivo para E. histolytica, sendo 78 sintomáticos e 76 assintomáticos, na tentativa de melhorar e facilitar o diagnóstico da amebiase no Brasil. Todos os testes sorológicos se mostraram bons para discriminar amebiase invasiva de näo invasiva. Contudo näo se mostraram adequados para detectar os sintomáticos com colite näo disentérica e os assintomáticos, que representam a maioria dos casos de amebiase no Brasil. Os soros dos indivíduos infectados com outras amebas näo se mostraram reativos, demonstrando a especificidade das reaçöes utilizadas no diagnóstico da amebiase. Nossos resultados demonstraram que a RIFI doi o teste mais sensível e a CIE o mais específico, a HAI seria o teste de escolha para levantementos epidemiológicos e a RFC o teste com menor especificidade

Infeccao humana adquirida em laboratorio causada pelo virus SPH 114202 (Arenavirus: familia Arenaviridae): aspectos clinicos e laboratoriais / Laboratory acquired infection by the virus SP H 114202 (Arenavirus : Arenaviridae) : clinical and laboratory findings

Sao descritos os achados clinico-laboratoriais da infeccao acidental pelo virus SP H 114202 (Arenavirus, familia Arenaviridae), um virus novo causador de febre hemorragica humana. O paciente, tecnico de laboratorio, apresentou quadro febril por 13 dias. A doenca cursou com febre elevada (39ºC) diaria, cefaleia, calefrios e mialgias por 8 dias. A partir do 3§ dia surgiram nauseas, vomitos alimentares e anorexia e no 10§ dia, epigastralgia, diarreia e gengivorragia....

Detección viral en infecciones respiratorias agudas del lactante / Viral detection in acute respiratory infections in infants

Los virus respiratorios se detectan en un alto porcentaje en la patología respiratoria aguda que afecta al lactante. No nos debe llamar la atención que un alto porcentaje de virus detectados aparecieron en los cuadros de Neumonitis. Es llamativo el alto porcentaje de positividad viral encontrado en las Bronconeumonias. Por último, el aumento de la detección viral observada en los últimos años se debe fundamentalmente a la introducción de nuevas técnicas, específicamente, la detección de antígenos virales por inmunofluorescencia directa y aislamiento viral a partir del aspirado nasofaríngeo y también, a la adecuada toma, envío y procesamiento de las muestras